<!DOCTYPE html>
<html class="client-nojs vector-feature-language-in-header-enabled vector-feature-language-in-main-page-header-disabled vector-feature-page-tools-pinned-disabled vector-feature-toc-pinned-clientpref-0 vector-toc-not-available vector-feature-main-menu-pinned-disabled vector-feature-limited-width-clientpref-1 vector-feature-limited-width-content-enabled vector-feature-custom-font-size-clientpref-1 vector-feature-appearance-pinned-clientpref-0 skin-theme-clientpref-day vector-sticky-header-enabled" lang="de" dir="ltr"><head>
<meta charset="UTF-8">
<title>Blotting</title>
<meta name="viewport" content="width=device-width, initial-scale=1.0">
<link rel="icon" type="image/png" href="./_res_/favicon.png">
<link rel="canonical" href="https://de.wikipedia.org/wiki/Blotting"> <link href="./_mw_/ext.cite.styles.css" rel="stylesheet" type="text/css">
<link href="./_mw_/ext.wikimediamessages.styles.css" rel="stylesheet" type="text/css">
<link href="./_mw_/skins.vector.icons.css" rel="stylesheet" type="text/css">
<link href="./_mw_/skins.vector.search.codex.styles.css" rel="stylesheet" type="text/css">
<link href="./_mw_/skins.vector.styles.css" rel="stylesheet" type="text/css">
<meta name="ResourceLoaderDynamicStyles" content="">
<link href="./_mw_/ext.gadget.citeRef.css" rel="stylesheet" type="text/css">
<link href="./_mw_/ext.gadget.defaultPlainlinks.css" rel="stylesheet" type="text/css">
<link href="./_mw_/ext.gadget.dewikiCommonHide.css" rel="stylesheet" type="text/css">
<link href="./_mw_/ext.gadget.dewikiCommonLayout.css" rel="stylesheet" type="text/css">
<link href="./_mw_/ext.gadget.dewikiCommonStyle.css" rel="stylesheet" type="text/css">
<link href="./_mw_/ext.gadget.dewikiDarkmode.css" rel="stylesheet" type="text/css">
<link href="./_mw_/ext.gadget.dewikiResponsive.css" rel="stylesheet" type="text/css">
<link href="./_mw_/ext.gadget.specialSearch.css" rel="stylesheet" type="text/css">
<link rel="stylesheet" type="text/css" href="./_mw_/site.styles.css">
<link rel="stylesheet" type="text/css" href="./_mw_/noscript.css">
<link rel="stylesheet" type="text/css" href="./_res_/footer.css">
<link rel="stylesheet" type="text/css" href="./_res_/vector-2022.css">
</head>
<body class="skin--responsive skin-vector skin-vector-search-vue mediawiki ltr sitedir-ltr mw-hide-empty-elt ns-0 ns-subject page-Blotting rootpage-Blotting skin-vector-2022 action-view">
<div class="mw-page-container">
<div class="mw-page-container-inner">
<div class="mw-content-container">
<main id="content" class="mw-body">
<header class="mw-body-header vector-page-titlebar">
<h1 id="firstHeading" class="firstHeading mw-first-heading"><span class="mw-page-title-main">Blotting</span></h1>
</header>
<a id="top"></a>
<div id="bodyContent" class="vector-body ve-init-mw-desktopArticleTarget-targetContainer" aria-labelledby="firstHeading" data-mw-ve-target-container="">
<div id="contentSub">
<div id="mw-content-subtitle"></div>
</div>
<div id="mw-content-text" class="mw-body-content mw-content-ltr" lang="de" dir="ltr"><div class="mw-content-ltr mw-parser-output" lang="de" dir="ltr"><p>Als <b>Blotting</b> oder <b>Blotten</b> bezeichnet man in der <a href="Molekularbiologie" title="Molekularbiologie">Molekularbiologie</a> ein Verfahren zum Transfer von Molekülen wie <a href="Desoxyribonukleins%C3%A4ure" title="Desoxyribonukleinsäure">DNA</a>, <a href="Ribonukleins%C3%A4ure" title="Ribonukleinsäure">RNA</a> oder <a href="Protein" title="Protein">Proteine</a> auf eine Membran. Der Name leitet sich aus dem englischen „to blot“ (klecksen, beflecken, mit Löschpapier abtupfen) ab, was auf die Vorgehensweise anspielt. Das Lehrbuch <i>Der Experimentator</i> beschreibt das Blotting als den „Versuch, etwas, das man zuvor in einem Gel elektrophoretisch getrennt hat, dauerhaft auf einer Membran zu fixieren“.<sup id="cite_ref-Mülhardt_1-0" class="reference"><a href="#cite_note-Mülhardt-1"><span class="cite-bracket">[</span>1<span class="cite-bracket">]</span></a></sup>
</p><p><a href="Edwin_Southern" title="Edwin Southern">Edwin Southern</a> führte 1975 die Blotting-Technik für DNA ein, die als <a href="Southern_Blot" title="Southern Blot">Southern Blot</a> bezeichnet wird.<sup id="cite_ref-2" class="reference"><a href="#cite_note-2"><span class="cite-bracket">[</span>2<span class="cite-bracket">]</span></a></sup> In Anlehnung an seinen Namen wurden die später von <a href="George_R._Stark" title="George R. Stark">George R. Stark</a> entwickelten Blotting-Techniken für RNA als <a href="Northern_Blot" title="Northern Blot">Northern Blot</a> und für Proteine als <a href="Western_Blot" title="Western Blot">Western Blot</a> bezeichnet. Darüber hinaus existieren <a href="Southwestern_Blot" title="Southwestern Blot">Southwestern-Blotting</a> für DNA-Protein-, <a href="Northwestern_Blot" title="Northwestern Blot">Northwestern-Blotting</a> für RNA-Protein- und <a href="Far-Western-Blot" title="Far-Western-Blot">Far-Western-Blotting</a> für Protein-Protein-Interaktionsanalysen.
</p>
<div class="mw-heading mw-heading2"><h2 id="Gemeinsames_Prinzip">Gemeinsames Prinzip</h2></div>
<p>Das zu untersuchende Material (DNA, RNA oder Proteine) wird mittels <a href="Gelelektrophorese" title="Gelelektrophorese">Gelelektrophorese</a> getrennt. Anschließend wird es auf eine <i>Blotmembran</i> (ein <a href="Filter_(Fluidtechnik)" title="Filter (Fluidtechnik)">Filter</a>, beispielsweise aus <a href="Nitrozellulose" class="mw-redirect" title="Nitrozellulose">Nitrozellulose</a>, <a href="Polyamide#Nylon" title="Polyamide">Nylon</a>, <a href="PVDF" class="mw-redirect" title="PVDF">PVDF</a> oder <a href="Glasfaser" title="Glasfaser">Glasfaser</a>) übertragen (das eigentliche Blotting) und dort irreversibel fixiert. Im nächsten Schritt wird meist ein <a href="Antik%C3%B6rper" title="Antikörper">Antikörper</a> oder eine <a href="Radioaktiv" class="mw-redirect" title="Radioaktiv">radioaktiv</a> markierte Sonde (eine <a href="Gensonde" title="Gensonde">Gensonde</a> bei Nukleinsäuren, eine <a href="Immunf%C3%A4rbung" class="mw-redirect" title="Immunfärbung">Immunfärbung</a> bei Proteinen) hinzugefügt. Gensonden bleiben nur an der gesuchten <a href="Nukleotidsequenz" title="Nukleotidsequenz">Sequenz</a> haften (<a href="Hybridisierung_(Molekularbiologie)" title="Hybridisierung (Molekularbiologie)">Hybridisierung</a>). Die ungebundenen Sonden werden abgewaschen und der Filter auf einen <a href="R%C3%B6ntgenfilm" title="Röntgenfilm">Röntgenfilm</a> gelegt, der durch die <a href="Chemolumineszenz" class="mw-redirect" title="Chemolumineszenz">Chemolumineszenz</a> oder <a href="Autoradiographie" title="Autoradiographie">Autoradiographie</a> belichtet wird und so die Ergebnisse der <a href="Elektrophorese" title="Elektrophorese">Elektrophorese</a> anzeigt.
</p>
<div class="mw-heading mw-heading2"><h2 id="Literatur">Literatur</h2></div>
<ul><li><a href="Thomas_Maniatis" class="mw-redirect" title="Thomas Maniatis">Thomas Maniatis</a>, Edward F. Fritsch, <a href="Joseph_Sambrook" title="Joseph Sambrook">Joseph Sambrook</a>: <i>Molecular Cloning. A Laboratory Manual.</i> Cold Spring Harbor Laboratory, Cold Spring Harbour NY 1982, ISBN 0-87969-136-0.</li></ul>
<div class="mw-heading mw-heading2"><h2 id="Einzelnachweise">Einzelnachweise</h2></div>
<ol class="references">
<li id="cite_note-Mülhardt-1"><span class="mw-cite-backlink"><a href="#cite_ref-Mülhardt_1-0">↑</a></span> <span class="reference-text">Cornel Mülhardt: <i><a rel="nofollow" class="external text" href="https://books.google.de/books?id=vW07qhAzdfcC&pg=PT87&lpg=PT87&dq=Der+Experimentator,+Ein+Blot+ist+der+Versuch&source=bl&ots=nB5Ensb5uz&sig=UiQecy8ahfnV1Bvka34z4wDou7A&hl=de&ei=-4thS_XLK5DWmwODp-zHDA&sa=X&oi=book_result&ct=result#v=onepage&q=&f=false">Der Experimentator. Molekularbiologie / Genomics.</a></i> Spektrum, Akademischer Verlag, Heidelberg 2009, ISBN 978-3-8274-2036-7, S. 75.</span>
</li>
<li id="cite_note-2"><span class="mw-cite-backlink"><a href="#cite_ref-2">↑</a></span> <span class="reference-text">Edwin M. Southern: <i>Detection of specific sequences among DNA fragments separated by gel electrophoresis.</i> In: <i>Journal of Molecular Biology.</i> Bd. 98, Nr. 3, November 1975, <span class="-print"><a href="Internationale_Standardnummer_f%C3%BCr_fortlaufende_Sammelwerke" title="Internationale Standardnummer für fortlaufende Sammelwerke">ISSN</a> <span style="white-space:nowrap"><a rel="nofollow" class="external text" href="https://zdb-katalog.de/list.xhtml?t=iss%3D%220022-2836%22&key=cql">0022-2836</a></span></span>, S. 503–517, <a class="external mw-magiclink-pmid" rel="nofollow" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/1195397?dopt=Abstract">PMID 1195397</a>, <a href="Digital_Object_Identifier" title="Digital Object Identifier">doi</a>:<span class="uri-handle" style="white-space:nowrap"><a rel="nofollow" class="external text" href="https://doi.org/10.1016/S0022-2836%2875%2980083-0">10.1016/S0022-2836(75)80083-0</a></span>.</span>
</li>
</ol></div><!--htdig_noindex--><div><div class="zim-footer">
Dieser Artikel wurde von <a class="external text" title="Zuletzt bearbeitet am 2021-01-28" href="https://de.wikipedia.org/wiki/?title=Blotting&oldid=208184332">Wikipedia</a> herausgegeben. Der Text ist unter <a class="external text" href="https://creativecommons.org/licenses/by-sa/4.0/deed.de">Creative Commons Attribution-Share Alike 4.0</a> verfügbar, sofern nicht anders angegeben. Für die Mediendateien können zusätzliche Bedingungen gelten.
</div>
</div><!--/htdig_noindex--></div>
</div>
</main>
</div>
</div>
</div>
<script src="./_webp_/webpHandler.js"></script>
</body></html>